熒光顯微鏡及熒光數(shù)碼成像拍照的選擇及注意事項(xiàng)

熒光顯微鏡以及熒光拍照相機(jī)(顯微鏡相機(jī))

熒光顯微鏡是用短波長(zhǎng)的光線照射用熒光素染色過(guò)的被檢物體，使之受激發(fā)后而產(chǎn)生長(zhǎng)波長(zhǎng)的熒光，然后觀察。熒光顯微鏡廣泛應(yīng)用于生物，醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域等

⑴熒光顯微鏡—般分為透射和落射式兩種類(lèi)型。

a.透射式激發(fā)光來(lái)自被檢物體的下方，聚光鏡為暗視野聚光鏡，使發(fā)光不進(jìn)入物鏡，而使熒光進(jìn)入物鏡。它在低倍情況下明亮，而高怕僅暗，在注漫和淘中時(shí)，較誰(shuí)操作，尤以低倍的照明被圍準(zhǔn)于確定，但能得到很暗的視野背景。透射式不使用于非透明的被檢物體。

b.落射式目前幾乎被淘汰，新型的熒光顯微統(tǒng)多為落射式，光源來(lái)自被檢動(dòng)依的上方，在光路中具有分光鏡，所以對(duì)透明和不適明的被檢物休體都適用。由于物確起了聚光接的作用，不僅便于操作，而且從低倍到高倍，可以實(shí)現(xiàn)整個(gè)視場(chǎng)的均勻照明。

(2)熒光鏡檢術(shù)的注意事項(xiàng)

a.激發(fā)光長(zhǎng)時(shí)間的照射，會(huì)發(fā)生光的衰減和淬滅現(xiàn)象，因此盡可能縮短觀察時(shí)間，暫時(shí)不觀察時(shí)，應(yīng)用擋板遮蓋發(fā)光。

b.作油鏡觀察時(shí)，應(yīng)用無(wú)熒光鏡油"。

c.做熒光實(shí)驗(yàn)，普遍熒光比較弱，應(yīng)在較暗的室內(nèi)進(jìn)行。電源可裝穩(wěn)壓器，否則電壓不穩(wěn)不僅會(huì)降低汞燈的壽命，也會(huì)影響效果，目前新研究領(lǐng)域都會(huì)用到熒光顯微鏡，如基因原位雜交FISH)等。

熒光拍攝通常需要使用制冷型CCD（成像系統(tǒng)相機(jī)），因?yàn)橹评?/span>CCD可以減少背景噪聲，對(duì)弱熒光信號(hào)采集很有好處，特別是像單分子成像。采集強(qiáng)光信號(hào)不一定要用制冷CCD，可使用黑白相機(jī)，彩色相機(jī)不適合熒光采集，因?yàn)槠涓泄舛鹊汀⒎直媛室驳停菬晒庑盘?hào)很高，對(duì)分辯率要求不高或者使用雙通道濾色片時(shí)才適合用彩色相機(jī)。

熒光顯微鏡可以用啟步BM1000Z 2000Z  BM4000D BM3000D，進(jìn)口可使用奧林巴斯BX53、BX43、CKX53。尼康NI、CI系列等都可以，相機(jī)也可以用我公司的BSW-CD-16 BSW-CD-630 BSW-CD-230等都是不錯(cuò)的選擇。